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信号通路
英文名称: Mouse Surfactant Protein B (SP-B) ELISA Kit
别名: SP-B
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.4ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
表面活性物质关联蛋白B是肺部表面活性剂中发现的一种重要的脂质相关蛋白。没有它,肺就不能在深呼吸后充气。它能重新排列肺内液体中的脂质分子,使肺内的小气囊,即肺泡,能更容易地充气。SP-B由SFTPB编码,它是2号染色体上一个11425个核苷酸长的基因。该基因的突变是上述几种肺部疾病的基础。框移突变和几个单核苷酸多态性(SNPs)都被发现与各种肺部疾病有关。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的SP-B, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.08
1.31
0.75
0.5
0.33
0.25
0.21
0.09
校正OD 值
1.99
1.22
0.66
0.41
0.16
0.16
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠SP-B , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.6-102.6
96.70
细胞裂解液(n=8)
92.8-105.6
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.0
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度小鼠SP-B , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.6
91.80
88.6-96.6
93.50
90.1-110.4
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.3
94.90
87.7-108.0
98.50
105.4-115.4
108.10
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