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信号通路
英文名称: Mouse Muscle Ring-Finger Protein-1(MuRF1) ELISA Kit
别名: MuRF1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.07ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
E3泛素蛋白连接酶TRIM63,又称 "MuRF1",由TRIM63基因编码的酶。该基因编码的RING锌指蛋白家族的一个成员,在横纹肌和虹膜中发现。该基因的产物定位于肌纤维的Z线和M线晶格,其中titin的N端和C端区域分别与肌纤维结合。体外结合研究表明,这种蛋白也直接与含有激酶活性的titin区域附近的titin结合。该蛋白家族的另一个成员与微管结合。由于这些家族成员可以形成异源二聚体,这表明这些蛋白可能作为肌肉中肌球蛋白激酶和微管依赖性信号途径之间的纽带。MuRF1是文献中最常用的名称,它代表着 " 肌肉RING Finger 1"。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1(MuRF1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1(MuRF1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的MuRF1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2
1.56
1.14
0.76
0.49
0.33
0.24
0.1
校正OD 值
1.91
1.47
1.05
0.67
0.24
0.24
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠MuRF1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
88.6-101.2
96.60
细胞裂解液(n=8)
94.8-106.5
103.60
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠MuRF1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
82.8-94.3
91.80
88.3-97.7
92.50
1:04
范围
平均回收率
89.4-102.3
95.80
87.3-111.5
98.80
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