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信号通路
英文名称: Mouse Cytokeratin 18-M65 (CK18-M65) ELISA Kit
别名: CK18-M65
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.074ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)是细胞骨架的中间丝蛋白家族中最大,最复杂的亚类,CK18属于其中一员,主要包括M30和M65两个片段.血浆中的M65片段可反映细胞坏死后释放入血的CK18的总量,而M30片段则成为临床上细胞凋亡的标志物之一.近年来随着研究的不断扩展深入,CK18不仅在多个系统的肿瘤的诊断以及转移,复发,预后均有意义,而且在肝脏疾病以及重症感染等领域的作用越发被认识以及重视。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠细胞角蛋白18-M65(CK18-M65)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠细胞角蛋白18-M65(CK18-M65)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的CK18-M65, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.19
1.71
1.2
0.74
0.48
0.32
0.21
0.07
校正OD 值
2.1
1.62
1.11
0.65
0.23
0.23
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠CK18-M65 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.1
96.30
血浆(n=8)
92.6-105.3
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.2
104.70
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠CK18-M65 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.8
91.30
88.4-96.4
93.90
90.0-110.5
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.9
94.10
87.9-108.0
98.60
105.8-115.5
108.70
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