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信号通路
英文名称: Mouse Cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) ELISA Kit
别名: CYP3A4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.74ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
细胞色素P4503A4(CYP3A4)是体内一种重要的酶,主要存在于肝脏和肠道中。它氧化外来的小分子有机物(异物),如毒素或药物,以便将它们从体内清除。它是细胞色素P450氧化酶家族的一个成员。这个家族的其他几个成员也参与药物代谢,但CYP3A4是最常见和用途最广的一个。像这个家族的所有成员一样,它是一种血蛋白,即含有一个铁原子的血红素组的蛋白质。虽然许多药物被CYP3A4停用,但也有一些药物被该酶激活。一些物质,如一些药物和葡萄柚汁中的呋喃香豆素,会干扰CYP3A4的作用。因此,这些物质会放大或削弱那些被CYP3A4改造的药物的作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠细胞色素P4503A4(CYP3A4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠细胞色素P4503A4(CYP3A4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的CYP3A4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.23
1.31
0.9
0.62
0.43
0.32
0.26
0.1
校正OD 值
2.14
1.22
0.81
0.53
0.23
0.23
0.17
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠CYP3A4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.4-101.6
96.50
细胞裂解液(n=8)
92.0-105.2
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.9
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度小鼠CYP3A4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.6
90.70
88.4-96.9
93.40
90.2-110.9
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.9
94.30
87.7-108.4
98.30
105.4-115.0
108.10
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