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信号通路
英文名称: Mouse Cytochrome P450 2E1 (CYP2E1) ELISA Kit
别名: CYP2E1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.4ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
细胞色素P450 2E1(缩写为CYP2E1)是细胞色素P450混合功能氧化酶系统的一个成员,参与体内异物的代谢。这类酶分为若干亚类,包括CYP1、CYP2和CYP3,它们作为一个群体主要负责哺乳动物体内外来化合物的分解。与CYP2E1相关的疾病包括酒精性肝硬化和脂肪性肝病。其相关途径包括维生素A和类胡萝卜素代谢和他莫西芬代谢。与该基因相关的基因本体论注释包括酶结合和铁离子结合。该基因的一个重要类似物是CYP2C19。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的CYP2E1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.39
1.73
1.2
0.78
0.49
0.35
0.23
0.08
校正OD 值
2.3
1.64
1.11
0.69
0.26
0.26
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠CYP2E1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.8-105.8
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.9
105.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠CYP2E1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
88.9-96.9
93.60
90.5-110.7
96.40
1:04
范围
平均回收率
87.4-108.5
98.30
105.9-115.9
109.30
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