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信号通路
英文名称: Mouse Cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit
别名: Cyt-C
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.76ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
细胞色素C,是一种与线粒体内膜松散相连的小血蛋白。它属于细胞色素c蛋白家族,在细胞凋亡中起着主要作用。细胞色素c是高度水溶性的,与其 他细胞色素不同,它是呼吸电子传输链的一个重要组成部分,它携带一个电子。它能够经历氧化和还原,因为它的铁原子在亚铁和铁的形式之间转换, 但不与氧气结合。它在复合物 III(辅酶Q-细胞c还原酶)和IV(细胞 c 氧 化酶)之间转移电子。细胞色素c是由Cyt-C 基因编码的。细胞色素 c 的主 要结构是由大约100个氨基酸组成的链条。许多高阶生物拥有一条104个氨 基酸的链。细胞色素c是一种在不同物种中高度保守的蛋白质,在植物、动 物和许多单细胞生物中都有发现。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠细胞色素C(Cyt-C)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠细胞色素C(Cyt-C)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的Cyt-C, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.97
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.88
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠Cyt-C , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-101.0
96.70
细胞裂解液(n=8)
92.1-105.6
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.3
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度小鼠Cyt-C , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.1
91.90
88.3-96.7
93.70
90.0-110.0
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.8
94.40
87.1-108.5
98.60
105.7-115.8
108.70
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