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信号通路
英文名称: Mouse zonula occludens-1 (ZO-1) ELISA Kit
别名: ZO-1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.12-5000pg/mL
灵敏度: 38pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
ZO-1，又称紧密连接蛋白1，是一种220kD的外周膜蛋白，由TJP1基因编码。它属于Zonula occludens蛋白家族（ZO-1、ZO-2和ZO-3），是紧密连接相关蛋白，其中ZO-1是第一个被克隆的。它作为一种支架蛋白，将紧密连接（TJ）链蛋白（脂质双层中的纤维状结构）交联并固定在肌动蛋白细胞骨架上。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠紧密连接蛋白1(ZO-1)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠紧密连接蛋白1(ZO-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的ZO-1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312.5
156.2
78.12
0
OD值
2.56
1.71
1.19
0.79
0.46
0.3
0.23
0.08
校正OD 值
2.47
1.62
1.1
0.7
0.21
0.21
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠ZO-1 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
82.1-101.4
96.50
细胞裂解液(n=8)
92.1-105.0
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.1
105.20
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度小鼠ZO-1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.8-95.2
91.60
88.0-97.8
93.20
90.0-110.8
96.30
1:04
范围
平均回收率
90.5-103.7
95.10
87.9-108.3
98.60
104.9-115.5
108.90
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