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信号通路
英文名称: Mouse Neurotrophin 4 (NT4) ELISA Kit
别名: NT-4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 18.27pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
神经营养因子4(NT-4),又称神经营养因子5(NT-5),由NTF4基因编码的蛋白质。它是一种神经营养因子,主要通过TrkB受体酪氨酸激酶发出信号。该基因是神经营养因子家族中的一员,即神经营养素,控制着哺乳动物神经元的生存和分化。该基因的表达是无处不在的,受环境信号的影响较小。其他神经营养素的基因敲除,包括神经生长因子、脑源性神经营养因子和神经营养素3,在出生后的早期发育中被证明是致命的,而NTF5缺陷的小鼠只显示轻微的细胞缺陷,并正常发育到成年。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠神经营养因子4(NT-4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠神经营养因子4(NT-4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的NT-4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.39
1.67
1.17
0.71
0.52
0.33
0.27
0.1
校正OD 值
2.3
1.58
1.08
0.62
0.24
0.24
0.18
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠NT-4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
85.2-101.6
96.80
血浆(n=8)
92.5-105.8
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.5
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠NT-4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.4
91.10
88.8-96.6
93.60
90.9-110.0
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.8
94.10
87.3-108.1
98.40
105.8-115.5
108.60
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