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信号通路
英文名称: ELISA Kit for Phosphatase And Tensin Homolog (PTEN)
别名: PTEN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.08ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
磷酸酶张力蛋白同源物,也被称为PTEN,是由PTEN基因编码的磷酸酶。 该基因的突变是许多癌症发展的一个步骤,特别是胶质母细胞瘤、肺癌、乳 腺癌和前列腺癌。对应于PTEN(直系同源物)的基因已在大多数哺乳动物 中被鉴定出来,并获得了完整的基因组数据。它通过其磷酸酶蛋白产物的作 用充当肿瘤抑制基因。这种磷酸酶参与细胞周期的调节,防止细胞生长和分 裂过快。它是许多抗癌药物的靶点。该基因编码的蛋白质是一种磷脂酰肌醇 -3,4,5-三磷酸 3-磷酸酶。它包含一个类似张力蛋白的结构域以及一个类似于 双特异性蛋白酪氨酸磷酸酶的催化结构域。与大多数蛋白质酪氨酸磷酸酶不同,这种蛋白质优先使磷酸肌醇底物去磷酸化。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的PTEN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠PTEN , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.5-101.1
96.50
血浆(n=8)
92.1-106.3
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.6
107.40
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠PTEN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.5
91.90
88.2-96.1
93.50
90.4-110.7
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.6
94.80
87.9-108.8
98.80
105.4-115.9
108.80
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