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信号通路
英文名称: Mouse Phosphoglycerate dehydrogenase (PHGDH) ELISA Kit
别名: PHGDH
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.16ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)是一种催化化学反应的酶。它是一个四聚体,由四个相同的、不对称的亚单位组成。在任何时候,最多只有两个相邻的亚单位呈现出催化活性位点;另外两个亚单位被迫进入非活性构象。这导致活性位点和异生位点的活动各占一半,这意味着只有活性亚基的两个位点必须被结合,才能在催化和抑制方面发挥最大的作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的PHGDH, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.04
1.61
1.23
0.84
0.53
0.35
0.23
0.08
校正OD 值
1.95
1.52
1.14
0.75
0.26
0.26
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠PHGDH , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.2
95.30
血浆(n=8)
92.1-105.9
103.20
组织匀浆(n=8)
96.3-108.9
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度小鼠PHGDH , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
85.4-94.9
91.50
88.6-95.9
93.50
90.2-110.4
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.7
94.20
87.9-108.8
98.30
105.0-114.1
107.50
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