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信号通路
英文名称: Mouse Phosphorylation Signal Transducer 和 Activator Of Transcription 3 (STAT3) ELISA Kit
别名: p-STAT3
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.35ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
磷酸化信号传导子及转录激活子3(p-STAT3)在大多数肝脏转移中表达,STAT3以非活性状态定位在细胞质中。不同的细胞因子如白细胞介素-6、生长因子和脂质代谢物的刺激可引发其随后被上游受体酪氨酸激酶(如表皮生长因子受体)和受体相关酪氨酸激酶(如Janus激酶和Src)在705位的酪氨酸磷酸化而激活。激活后,pSTAT3会发生二聚体化、核转位、DNA结合和靶基因转录。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠磷酸化信号传导子及转录激活子3(p-STAT3)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠磷酸化信号传导子及转录激活子3(p-STAT3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的p-STAT3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.28
1.79
1.37
1
0.65
0.39
0.26
0.09
校正OD 值
2.19
1.7
1.28
0.91
0.3
0.3
0.17
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠p-STAT3 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.6-101.0
96.20
细胞裂解液(n=8)
92.7-105.2
102.30
细胞培养上清(n=8)
97.6-108.2
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度小鼠p-STAT3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.6
91.10
88.8-96.1
93.20
90.1-110.5
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.3
94.30
87.4-108.1
98.90
105.2-115.1
108.20
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