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信号通路
英文名称: Mouse Phosphorylated AKT protein (p-AKT) ELISA Kit
别名: p-AKT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.079ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
磷酸化AKT蛋白(p-AKT)是一种信号转导蛋白，在各种类型的肿瘤中发挥着抑制细胞凋亡的核心作用。AKT是一组三个丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶的总称，在多个细胞过程中发挥关键作用，如葡萄糖代谢、细胞凋亡、细胞增殖、转录和细胞迁移。三个不同的基因编码蛋白激酶B异构体的基因被称为AKT1、AKT2和AKT3，分别编码RAC α、β和γ丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。pAKT与预后不良以及化疗和放疗抗性有关。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠磷酸化AKT蛋白(p-AKT)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠磷酸化AKT蛋白(p-AKT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的p-AKT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.4
1.69
1.29
0.9
0.61
0.43
0.31
0.09
校正OD 值
2.31
1.6
1.2
0.81
0.34
0.34
0.22
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠p-AKT , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
83.1-101.2
95.80
血浆(n=8)
93.3-105.0
103.30
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.1
105.80
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠p-AKT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-96.0
92.60
88.9-96.2
93.60
90.4-110.5
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.5
94.90
87.3-108.3
98.40
105.7-115.6
108.40
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