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信号通路
英文名称: Mouse Heparanase (HPSE) ELISA Kit
别名: HPSE
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 8.2pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
硫酸乙酰肝素酶(HPSE),是一种在细胞表面和细胞外基质内发挥作用的酶,可将聚合硫酸肝素分子降解为较短链长的寡糖。该蛋白最初在高尔基体中以非活性的 65kDa 原肝素酶的形式合成,并转移到晚期内体/溶酶体中以运输到细胞表面。在溶酶体中,它被蛋白酶加工成其活性形式。它具有内切糖苷酶的活性,在聚合链内部的部位裂解聚合的硫酸肝素分子。该酶降解基底膜和细胞外基质的硫酸肝素支架。它还与炎症过程有关,允许活化的 T 淋巴细胞外渗。在眼球表面的生理学中,这种活性是前分泌性有丝分裂蛋白的一个开关。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠硫酸乙酰肝素酶(HPSE)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠硫酸乙酰肝素酶(HPSE)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的HPSE, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.97
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.88
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠HPSE , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.3
99.90
血浆(n=8)
95.2-105.9
102.90
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆中加入高浓度小鼠HPSE , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.7
91.50
83.7-96.7
93.10
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.4
97.20
87.2-108.6
98.20
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