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信号通路
英文名称: Mouse Thioredoxin Reductase (TrxR) ELISA Kit
别名: TrxR
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.075ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
氧还蛋白还原酶(TrxR)是已知的唯一能催化硫氧还蛋白还原的酶,因此它是硫氧还蛋白系统的一个核心组成部分。该系统与硫氧还蛋白(Trx)和NADPH一起,最一般的描述是在细胞中形成还原二硫键的方法。电子通过TrxR从NADPH获得,并转移到Trx的活性部位,Trx继续还原蛋白质二硫化物或其他底物。Trx系统存在于所有生物细胞中,其进化史与作为遗传物质的DNA、防御氧代谢引起的氧化损伤以及使用过氧化氢和一氧化氮等分子的氧化还原信号联系在一起。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠硫氧还蛋白还原酶(TrxR)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠硫氧还蛋白还原酶(TrxR)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的TrxR, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.44
1.87
1.29
0.83
0.58
0.38
0.27
0.08
校正OD 值
2.35
1.78
1.2
0.74
0.29
0.29
0.18
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠TrxR , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.9
96.80
血浆(n=8)
92.9-104.0
101.10
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.8
104.10
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠TrxR , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.3
91.90
87.3-96.4
92.80
90.5-110.0
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.2
94.60
87.8-108.9
98.30
105.6-115.8
108.80
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