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信号通路
英文名称: Mouse Interleukin 9 (IL-9) ELISA Kit
别名: IL-9
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 7.69pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素9 (IL-9)是一种分子量在28-30kDa之间的单体糖基化蛋白,属于IL-7/IL-9家族,是一种多效性细胞因子,主要由CD4+T细胞产生,肥大细胞和自然杀伤细胞也能产生IL-9。最初IL-9被认为是T细胞和肥大细胞的生长因子,之后研究发现IL-9还能调节B细胞免疫球蛋白的产生、增强肥大细胞蛋白酶的表达、促进杯状细胞增生和粘液产生,表明IL-9可能参与过敏性炎症反应的发生。IL-9包含144个氨基酸,其中包括18个氨基酸的信号肽,成熟的IL-9结构中还具有10个半胱氨酸残基和4个潜在的N连接糖基化位点。IL-9与受体结合后,会激活多种STATs,调节目标基因转录。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠白细胞介素9(IL-9)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠白细胞介素9(IL-9)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的IL-9, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.61
2.12
1.36
0.79
0.44
0.27
0.21
0.09
校正OD 值
2.52
2.03
1.27
0.7
0.18
0.18
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠IL-9 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.5
96.30
血浆(n=8)
92.7-105.9
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.2
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠IL-9 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.2
91.50
88.8-96.9
93.60
90.3-110.6
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.6
94.10
87.5-108.6
98.20
105.4-115.3
108.40
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