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信号通路
英文名称: Mouse Interleukin 33 (IL-33) ELISA Kit
别名: IL-33
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 6.25-400pg/mL
灵敏度: 1.84pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素-33(IL-33),也被称为NFHEV和DVS 27,是一种30 kDa的促炎症蛋白,也可能调节基因转录。IL33在平滑肌和气道上皮细胞中构成性地表达。在IL1α或IL1β刺激后,它在动脉平滑肌、真皮成纤维细胞和角质细胞中上调。IL-33与IL-1细胞因子家族有共同的结构和功能特点。它通过IL-1RL1/ST2受体结合并发出信号,激活NF-kappaB和MAP激酶。IL-33诱导产生TH2细胞相关的细胞因子,包括IL-4、IL-5和IL-13,并发挥多种炎症相关的生物活性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠白细胞介素33(IL-33)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠白细胞介素33(IL-33)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的IL-33, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
400
200
100
50
25
12.5
6.25
0
OD值
2.36
1.36
0.8
0.48
0.34
0.28
0.23
0.09
校正OD 值
2.27
1.27
0.71
0.39
0.19
0.19
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠IL-33 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
83.2-101.8
96.60
血浆(n=8)
93.3-105.0
102.60
细胞培养上清(n=8)
97.0-108.5
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠IL-33 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.0
91.10
88.1-96.6
93.60
92.1-110.8
96.70
1:04
范围
平均回收率
90.9-103.2
94.20
87.8-108.9
98.60
105.1-115.8
109.30
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