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信号通路
英文名称: Mouse Heat Shock Protein 70 (HSP-70) ELISA Kit
别名: HSP-70
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.58ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
热休克蛋白 70(HSP-70)是一个保守的普遍表达的热休克蛋白家族。具有类似结构的蛋白质几乎存在于所有生物体中。细胞内定位的 Hsp70s 是细胞的蛋白质折叠机制的重要组成部分,执行伴侣功能,并帮助保护细胞免受生理压力的不利影响。此外,膜结合的 Hsp70s 已被确定为癌症疗法的潜在目标, 其细胞外定位的对应物已被确定为具有膜结合和无膜结构。它在恶性黑色素瘤中过量表达,在肾细胞癌中过量表达,在乳腺癌细胞系(MCF7)中发现, Hsp70-1 和 Hsc70 与 ERα相互作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠热休克蛋白70(HSP-70)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠热休克蛋白70(HSP-70)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的HSP-70, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠HSP-70 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.8
96.20
血浆(n=8)
91.4-105.5
101.50
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.5
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠HSP-70 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.7
91.50
88.4-96.0
93.10
90.9-110.9
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.4-104.9
95.10
87.4-108.3
98.80
105.4-115.9
108.90
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