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信号通路
英文名称: Mouse Lymphocyte Activation Gene 3 (LAG3) ELISA Kit
别名: LAG3
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
淋巴细胞激活基因 3,又称 LAG-3,是一种蛋白质,由 LAG3 基因编码。LAG3 于 1990 年被发现,在 2000 年被命名为 CD223(cluster of differentiation 223),是一种细胞表面分子,对 T 细胞功能有多种生物效应。它是一种免 疫检查点受体,因此是制药公司寻求开发癌症和自身免疫性疾病新疗法的各 种药物开发项目的目标。它的可溶性形式也正在被开发为一种癌症药物,其 本身也是如此。LAG3 基因包含 8 个外显子。序列数据、外显子/内含子组织 和染色体定位都表明 LAG3 与 CD4 关系密切。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠淋巴细胞活化基因3(LAG3)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠淋巴细胞活化基因3(LAG3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的LAG3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.01
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠LAG3 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.9-101.0
96.10
细胞裂解液(n=8)
92.6-105.5
102.20
细胞培养上清(n=8)
97.1-108.5
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度小鼠LAG3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.9
91.10
88.2-96.3
93.40
90.2-110.8
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.9
94.80
87.0-108.7
98.70
105.0-115.8
108.30
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