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信号通路
英文名称: Mouse Amyloid Precursor Protein (APP) ELISA Kit
别名: APP
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.2ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
淀粉样前体蛋白也称淀粉样β前体蛋白(APP),是一种在许多组织中表达的整体膜蛋白,集中在神经元的突触中。它作为细胞表面受体,被认为是突触形成、神经可塑性、抗菌活性和铁输出的调节器。它由基因 APP 编码,受底物呈现的调节。APP 是最著名的前体分子,其蛋白分解产生淀粉样β(Aβ), 一种含有 37 至 49 个氨基酸残基的多肽。淀粉样β前体蛋白是一种古老而高度保守的蛋白质。基因 APP 位于 21 号染色体上,包含 18 个外显子,跨越290kb。已经观察到 APP 的几种替代拼接异构体,长度从 639 到 770 个氨基酸不等,某些异构体优先在神经元中表达。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠淀粉样前体蛋白(APP)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠淀粉样前体蛋白(APP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的APP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠APP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.4
96.70
血浆(n=8)
92.4-105.7
102.70
组织匀浆(n=8)
96.9-108.7
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度小鼠APP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.9
91.60
88.3-96.4
93.70
90.5-110.0
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.4
94.60
87.4-108.1
98.30
105.4-115.0
108.50
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