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信号通路
英文名称: Mouse Ubiquitin-like protein ISG15 (ISG15) ELISA Kit
别名: ISG15
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.152ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
泛素交叉反应蛋白(ISG15)是一种 17kDA 的分泌蛋白,由 ISG15 基因编码。它由 I 型干扰素(IFN)诱导,具有多种功能,既是细胞外细胞因子,又是细胞内蛋白修饰剂。确切的功能是多种多样的,在不同的物种中有所不同,但包括增强淋巴细胞中干扰素γ(IFN-II)的产生,对新合成的蛋白质进行类似泛素的结合,以及对 IFN-I 反应进行负向调节。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠泛素交叉反应蛋白(ISG15)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠泛素交叉反应蛋白(ISG15)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的ISG15, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠ISG15 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.3
95.70
血浆(n=8)
92.6-106.9
103.50
细胞裂解液(n=8)
96.9-108.6
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠ISG15 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.9
91.90
88.6-95.2
93.20
90.3-110.2
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.6
94.80
87.0-108.1
97.90
105.5-114.0
107.90
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