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信号通路
英文名称: Mouse Sirtuin 3 (SIRT3) ELISA Kit
别名: SIRT3
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.076ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
沉默调节蛋白3(SIRT3),也被称为NAD依赖性脱乙酰酶sirtuin-3线粒体,是由SIRT3基因编码的蛋白质。它是sirtuin蛋白质家族的成员,与酵母Sir2蛋白质同源。它表现出NAD+依赖性脱乙酰酶活性。sirtuin家族的成员以sirtuin核心结构域为特征,并分为四类,该基因编码的蛋白质包含在sirtuin家族的I类中。sirtuins具有一系列分子功能,并已成为衰老,抗压和代谢调节的重要蛋白质。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠沉默调节蛋白3(SIRT3)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠沉默调节蛋白3(SIRT3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的SIRT3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.34
1.66
1.07
0.68
0.43
0.32
0.23
0.1
校正OD 值
2.25
1.57
0.98
0.59
0.23
0.23
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠SIRT3 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
93.3-105.4
102.90
细胞裂解液(n=8)
96.8-108.6
104.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠SIRT3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
89.2-96.0
93.20
90.4-110.3
96.30
1:04
范围
平均回收率
87.9-108.4
98.30
105.6-115.9
109.10
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