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信号通路
英文名称: Mouse Regulated On Activation In Normal T-Cell Expressed And Secreted (RANTES) ELISA Kit
别名: RANTES;CCL5
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 7.2pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
正常T细胞表达和分泌因子(RANTES;CCL5)是一种8kDa的蛋白质,被归类为趋化细胞因子或趋化因子。它对T细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞有趋化作用,并在招募白细胞进入炎症部位方面起着积极作用。在T细胞释放的特定细胞因子(即IL-2和IFN-γ)的帮助下,它还能诱导某些自然杀手(NK)细胞的增殖和激活,形成CHAK(CC-巨噬细胞激活的杀手)细胞。它也是CD8+T细胞释放的HIV抑制因子。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES;CCL5)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES;CCL5)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的RANTES;CCL5, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.1
1.86
1.36
0.94
0.57
0.36
0.25
0.09
校正OD 值
2.01
1.77
1.27
0.85
0.27
0.27
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠RANTES;CCL5 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.0
96.30
血浆(n=8)
92.7-105.8
101.20
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.5
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠RANTES;CCL5 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.3
91.60
88.7-96.9
93.80
90.1-110.4
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.7
94.60
87.1-108.3
98.20
105.2-115.5
108.50
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