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信号通路
英文名称: Mouse nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit
别名: NF-KBp65
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.2-2000pg/mL
灵敏度: 15.2pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
核转录因子p65(NF-KB p65),又称为V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)或P65,是一种REL相关蛋白,参与NF-κB异源二聚体的形成、核转位和激活。NF-κB是一个重要的转录因子复合体,参与所有类型的细胞过程,包括细胞代谢、趋化等。RELA的磷酸化和乙酰化是NF-κB激活所需的关键。它也被证明可调节免疫反应,并且RELA的激活与多种类型的癌症呈正相关。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠核转录因子p65(NF-KBp65)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠核转录因子p65(NF-KBp65)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的NF-KBp65, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.2
0
OD值
2.11
1.26
0.8
0.5
0.33
0.24
0.19
0.08
校正OD 值
2.02
1.17
0.71
0.41
0.15
0.15
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠NF-KBp65 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.5-101.8
96.80
细胞裂解液(n=8)
92.7-105.6
102.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠NF-KBp65 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.0-96.1
91.70
88.2-96.4
93.40
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.8
94.10
87.2-108.7
98.10
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