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信号通路
英文名称: Mouse Terminal Complement Complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit
别名: TCC C5b-9
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000ng/mL
灵敏度: 6.74ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
末端补体复合物C5b-9(TCC)是一种通常在病原体细胞膜表面形成的蛋白质复合物,是宿主补体系统激活的结果,因此是免疫系统的一种效应物。抗体介导的补体激活导致TCC沉积在受感染的细胞表面。TCC的组装导致孔隙破坏目标细胞的细胞膜,导致细胞裂解和死亡。TCC是由补体成分C5b、C6、C7、C8和几个C9分子组成,也是由四个补体蛋白(C5b、C6、C7和C8)组成的复合物,它们与质膜的外表面结合,第五个蛋白(C9)的许多拷贝相互勾连,在膜上形成一个环。C9形成的环状结构是膜上的一个孔,允许分子自由扩散进入和离开细胞。如果形成足够多的孔隙,细胞就不再能够生存。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的TCC C5b-9, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.26
1.49
1.03
0.7
0.46
0.32
0.23
0.08
校正OD 值
2.17
1.4
0.94
0.61
0.23
0.23
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠TCC C5b-9 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.8
96.50
血浆(n=8)
92.8-105.1
102.70
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆中加入高浓度小鼠TCC C5b-9 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
85.2-95.4
91.70
88.0-96.6
93.80
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.8
94.60
87.1-108.2
98.40
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