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信号通路
英文名称: Mouse Microtubule-associated protein light chain 3II (LC3II) ELISA Kit
别名: LC3Ⅱ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
微管相关蛋白轻链 3II（LC3II）是一个蛋白质，虽然分子质量较大，但它在SDS-PAGE 凝胶中显示出更快的电泳流动性（可能是因为疏水性增加）。LC3是一种可溶性蛋白，分子质量为 17kDa，在真核生物中普遍分布。它以剪接变体 LC3A、LC3B 和 LC3C 的形式表达，显示出独特的组织分布。所有的 LC3异构体都经历翻译后修饰，特别是在自噬过程中的 PE 共轭（脂化）。自噬信号发出后，LC3 的细胞形态（LC3-I）与 PE 共轭，形成 LC3-PE 共轭物（LC3-II），被招募到自噬体膜上。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的LC3Ⅱ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠LC3Ⅱ , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.1-101.8
96.40
血浆(n=8)
92.7-105.0
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.9
105.90
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠LC3Ⅱ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.4
91.40
88.8-96.5
93.40
90.0-110.1
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.3
94.50
87.6-108.2
98.60
105.9-115.1
108.90
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