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信号通路
英文名称: Mouse Stem Cell Factor (SCF;MGF) ELISA Kit
别名: SCF;MGF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 6.54pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
干细胞因子又称肥大细胞生长因子(MGF),Kit配体(KL)及Steel因子(SLF),最初是从Buffalo大鼠肝细胞系中cDNA克隆成功,在小鼠MGF基因位于第10号染色体SL基因,是C-kit的配体(C-kit ligand,KL),因此也称之为造血生长因子KL。它是由骨髓微环境中的基质细胞产生的一种酸性糖蛋白。其糖基连在肽键的N和O基团上,相对分子质量31000~36000,由非共价结合的两个相同亚基组成。等电点PI=3.8。SCF共有273个氨基酸。从-25~-1为信号肽,+1~+189为膜外功能区,+190~+216为跨膜区,+217~+248为胞浆功能区。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠干细胞因子;肥大细胞生长因子(SCF;MGF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠干细胞因子;肥大细胞生长因子(SCF;MGF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的SCF;MGF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.62
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.96
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.87
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠SCF;MGF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.0
96.30
血浆(n=8)
92.0-106.7
102.90
细胞培养上清(n=8)
95.0-108.5
104.80
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠SCF;MGF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.0-95.9
92.70
88.6-96.9
93.10
90.2-110.0
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.4
94.10
87.5-109.0
98.70
106.9-115.9
109.50
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