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信号通路
英文名称: Mouse Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) ELISA Kit
别名: MIF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.75ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
巨噬细胞移动抑制因子(MIF),又称糖基化抑制因子(GIF)、L-多巴色异构酶或苯丙酮酸同构酶,是一种由MIF基因编码的蛋白质。该基因编码的淋巴因子参与细胞介导的免疫、免疫调节和炎症。MIF通过抑制糖皮质激素的抗炎作用,在宿主防御中对巨噬细胞的功能起调节作用。该淋巴因子和JAB1蛋白在细胞膜外周附近形成复合物。MIF是先天性免疫的一个重要调节因子。MIF蛋白超家族还包括第二个具有功能相关特性的成员,即D-多巴色异构酶(D-DT)。CD74是MIF的表面受体。巨噬细胞移动抑制因子组装成一个三聚体,由三个相同的亚基组成。每个单体都含有两个反平行的α螺旋和一个四股的β片。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的MIF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.14
1.63
1.16
0.78
0.57
0.36
0.24
0.07
校正OD 值
2.05
1.54
1.07
0.69
0.27
0.27
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠MIF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.8
96.30
血浆(n=8)
93.6-105.7
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.9
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠MIF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.9
91.30
88.2-96.4
93.20
90.7-110.2
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.0
94.90
87.9-108.1
98.60
105.5-115.0
108.40
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