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信号通路
英文名称: Mouse Nestin (Nestin)ELISA KIT
别名: Nestin
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Nestin 是一种蛋白质,是由 NES 基因编码的。Nestin(巢蛋白)是一种 VI型中间丝(IF)蛋白。这些中间丝蛋白主要在神经细胞中表达,它们与轴突的径向生长有关系。七个基因编码重神经丝(NF-H)、中神经丝(NF-M)和轻神经丝(NF-L)蛋白,神经细胞中的 nestin 和α-internexin,肌肉细胞中的 synemin α和 desmuslin/synemin β(DMN 基因的两个备选转录本),以及 syncoilin(也在肌肉细胞中)。这一组的成员大多喜欢在组织中以异质聚合物的形式联合起来。nestin 在体外形成同源二聚体和同源四聚体,但本身并不形成 IF。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠巢蛋白(Nestin)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠巢蛋白(Nestin)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的Nestin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠Nestin , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.9-105.8
102.40
细胞裂解液(n=8)
96.3-108.8
105.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠Nestin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.1-96.2
93.80
90.4-110.9
96.50
1:04
范围
平均回收率
87.8-108.1
98.10
105.8-115.0
108.40
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