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信号通路
英文名称: Mouse Plasminogen Activator, Urokinase (uPA) ELISA Kit
别名: uPA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.12ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)，也被称为尿激酶，是丝氨酸蛋白酶。由肾脏生成，可直接激活纤维蛋白溶酶原转变成纤溶酶。它是从尿中提取的第一代天然溶栓药。尿激酶蛋白是由McFarlane和Pilling在1947年发现的，但没有命名。它最初是从尿液中分离出来的，它也存在于血液和许多组织的细胞外基质中。这种酶的主要生理底物是纤溶酶原，它是丝氨酸蛋白酶纤溶酶的无活性形式（酶原）。 它直接作用于内源性纤维蛋白溶解系统，能催化裂解溶酶原成纤溶酶，后者不仅能降解纤维蛋白凝块，亦能降解血循环中的纤维蛋白原、凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅷ等，从而发挥溶栓作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠尿激酶型纤溶酶原启动因子(uPA)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠尿激酶型纤溶酶原启动因子(uPA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的uPA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.32
1.7
1.19
0.72
0.46
0.32
0.22
0.07
校正OD 值
2.23
1.61
1.1
0.63
0.23
0.23
0.13
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠uPA , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
86.9-101.9
96.10
血浆(n=8)
92.5-105.2
103.80
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠血清血浆中加入高浓度小鼠uPA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.6
91.10
88.5-96.9
93.60
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.7
94.70
87.1-108.6
98.50
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