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信号通路
英文名称: Mouse Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) ELISA Kit
别名: MMP9
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.62ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
基质金属肽酶9(MMP-9),又称92 kDa IV型胶原酶、92 kDa明胶酶或明胶酶B(GELB),是一种基质蛋白,属于锌-金属蛋白酶家族的一类酶,参与细胞外基质的降解。MMP9基因编码一个信号肽、一个前肽、一个插入了三个重复的纤连蛋白II型结构域的催化结构域,然后是一个C端血浆蛋白样结构域。基质金属蛋白酶(MMP)家族的蛋白质参与正常生理过程中细胞外基质的分解,如胚胎发育、生殖、血管生成、骨骼发育、伤口愈合、细胞迁移、学习和记忆,以及病理过程,如关节炎、脑内出血和转移。大多数MMPs以非活性原蛋白的形式分泌,当被细胞外蛋白酶裂解时被激活。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠基质金属蛋白酶9(MMP9)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠基质金属蛋白酶9(MMP9)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的MMP9, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠MMP9 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.7
96.70
血浆(n=8)
92.6-105.2
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.4
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠MMP9 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.7
91.50
88.0-96.0
93.20
90.8-110.0
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.3
94.90
87.9-108.9
98.20
105.7-115.5
108.70
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