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信号通路
英文名称: Mouse Eosinophil Cationic Protein (ECP) ELISA KIT
别名: ECP
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 62.5-4000pg/mL
灵敏度: 31.4pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
核糖核酸酶A3也被称为嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP),是位于嗜酸细胞初级基质中的一种基本蛋白。由RNASE3基因编码。ECP在嗜酸细胞脱颗粒时释放。这种蛋白与炎症和哮喘有关,因为在这些情况下,体内的ECP水平会增加。ECP有三种糖醇化形式,因此ECP的分子量范围在18-22kDa之间。嗜酸细胞阳离子蛋白和序列相关的嗜酸细胞源性神经毒素(RNASE2)都是核糖核酸酶a超家族成员。这两种蛋白都具有神经毒性、蠕虫毒性和核糖核酸解活性。嗜酸粒细胞阳离子蛋白定位于嗜酸粒细胞的颗粒基质。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的ECP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
4000
2000
1000
500
250
125
62.5
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠ECP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.8
96.90
血浆(n=8)
92.1-105.1
102.20
组织匀浆(n=8)
96.2-108.0
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度小鼠ECP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.7
91.20
88.4-96.1
93.60
90.6-110.0
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.7
94.80
87.7-108.1
98.90
105.8-115.8
108.90
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