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信号通路
英文名称: Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA KIT
别名: sTNFR1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 7.5pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(sTNFR1)是一种具有生物学活性的分泌性蛋白。 TNF 受体有 TNFR1(55KD)和 TNFR2 (75KD)2 种,均为糖蛋白,其中 TNFR1 得了大部分 TNF 的生物学功能,如抗病毒、诱导凋亡、活化 NFkB、成纤维 细胞增殖等。TNFR 分为膜结合型(mTNFR)和可溶型(sTNFR)2 种类型。可溶 型受体为膜结合型受体胞外区在 TNF 转换酶(TAGE)的作用下从细胞膜上解 离下来,游离在血液中,仍可与 TNF 结合,但是无法介导 TNF 的信号传导。 因此 sTNFR 能够竞争性地与 TNF 分子结合。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠可溶性肿瘤坏死因子受体1(sTNFR1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠可溶性肿瘤坏死因子受体1(sTNFR1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的sTNFR1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠sTNFR1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.9
96.20
血浆(n=8)
92.5-105.1
101.10
细胞裂解液(n=8)
96.3-108.5
104.60
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠sTNFR1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.5
91.40
88.7-96.3
93.40
90.0-110.2
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.3
94.90
87.6-108.8
98.20
105.5-115.9
108.20
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