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信号通路
英文名称: Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand(sRANKL) ELISA Kit
别名: sRANKL
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 7.6pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
核因子κB受体活化因子配基又称肿瘤坏死因子配体超家族成员11(TNFSF11)、TNF相关活化诱导细胞因子(TRANCE)、骨保护素配体(OPGL)和破骨细胞分化因子(ODF),是一种由TNFSF11基因编码的蛋白。它已被确认可以影响免疫系统并控制骨的再生和重塑。它是一个凋亡调节基因,是骨保护素(OPG)的结合伙伴,是受体RANK的配体,通过改变Id4、Id2和细胞周期蛋白D1的蛋白水平控制细胞增殖。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的sRANKL, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.27
1.62
1.07
0.65
0.44
0.33
0.24
0.08
校正OD 值
2.18
1.53
0.98
0.56
0.24
0.24
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠sRANKL , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
85.5-101.4
95.80
血浆(n=8)
92.1-106.5
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.1
104.20
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠sRANKL , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.7
91.20
88.6-95.2
93.70
90.7-110.1
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.7
94.30
87.6-108.3
98.50
105.8-114.1
107.40
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