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信号通路
英文名称: Mouse pro-Brain Derived Neurotrophic Factor (proBDNF) ELISA Kit
别名: proBDNF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.2-2000pg/mL
灵敏度: 15.5pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
脑源性神经营养因子(BDNF)属于神经营养因子家族,可刺激神经元生长和分化、突触发生和神经可塑性。脑源性神经营养因子合成为一种称为 pro-BDNF 的亚型,其分子量为 28-32 kDa,其中经典序列为 28 kDa。pro-BDNF 可以在细胞内和细胞外裂解为 14-kDa 成熟 BDNF(mBDNF 或通常简称为 BDNF)和 17-kDa 前肽。Pro-BDNF 具有生物活性并与 p75NTR 受体结合,而 mBDNF 对酪氨酸受体激酶 B (TrkB) 表现出底物特异性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠前脑源性神经营养因子(proBDNF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠前脑源性神经营养因子(proBDNF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的proBDNF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.2
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠proBDNF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-103.3
98.40
血浆(n=8)
92.1-105.9
102.10
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.5
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠proBDNF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.6
91.90
88.5-98.0
95.40
90.3-110.4
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.9
94.70
87.0-108.1
98.50
105.0-115.8
108.10
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