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信号通路
英文名称: Mouse Coagulation Factor V (F5) ELISA Kit
别名: F5
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.14ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血浆
隐藏域元素占位
详细信息
简介
凝血因子Ⅴ(F5)是凝血系统的一种蛋白质,由六个结构域组成:A1-A2-B-A3-C1-C2。与其他大多数凝血因子相比,它没有酶的活性,而是作为一种辅助因子发挥作用。缺陷会导致出血的倾向,而一些突变(最明显的是F5 Leiden)则容易导致血栓形成。F5的基因位于第一条染色体(1q24),它在基因组上与多铜氧化酶家族有关,并与凝血因子VIII同源。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠凝血因子Ⅴ(F5)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠凝血因子Ⅴ(F5)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的F5, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.32
1.7
1.19
0.72
0.46
0.32
0.22
0.07
校正OD 值
2.23
1.61
1.1
0.63
0.23
0.23
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠F5 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血浆(n=8)
92.7-105.2
102.60
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血浆中加入高浓度小鼠F5 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血浆
1:02
范围
平均回收率
87.5-96.2
93.60
1:04
范围
平均回收率
89.5-109.2
98.70
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