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信号通路
英文名称: Mouse Apoptosis Inducing Factor (AIF) ELISA Kit
别名: AIF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.81-500pg/mL
灵敏度: 3.87pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
凋亡诱导因子(AIF)通过引起DNA断裂和染色质凝结,参与启动与Caspase无关的凋亡途径(凋亡的积极内在调节器)。它是一种黄素蛋白。它也作为一种NADH氧化酶。AIF的另一个功能是在细胞凋亡时调节线粒体膜的通透性。正常情况下,它被发现在线粒体外膜的后面,因此与细胞核隔绝。然而,当线粒体被破坏时,它就会移动到细胞膜和细胞核中。AIF的失活导致胚胎干细胞在生长因子撤出后对死亡的抵抗,表明它参与了细胞凋亡。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠凋亡诱导因子(AIF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠凋亡诱导因子(AIF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的AIF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.25
15.62
7.81
0
OD值
2.1
1.78
1.51
1.04
0.76
0.45
0.3
0.07
校正OD 值
2.01
1.69
1.42
0.95
0.36
0.36
0.21
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠AIF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-101.5
95.30
细胞裂解液(n=8)
96.0-109.9
105.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠AIF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.8
91.40
90.1-110.3
95.10
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.8
94.50
105.4-114.9
107.60
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