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信号通路
英文名称: Mouse Apoptosis Signal Regulating Kinase 1 (ASK1) ELISA Kit
别名: ASK1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.12-5000pg/mL
灵敏度: 38pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
凋亡信号调节激酶 1 （ ASK1 ） 也被称为有丝分裂原活化蛋白激酶 5（MAP3K5），是 MAP 激酶家族的一员，因此是有丝分裂原活化蛋白激酶途径的一部分。它以独立于 Raf 的方式激活 c-Jun N-末端激酶（JNK）和p38 丝裂原激活蛋白激酶，以应对一系列的压力，如氧化压力、内质网压力和钙流入。ASK1 已被发现参与癌症、糖尿病、类风湿关节炎、心血管和神经退行性疾病。编码该蛋白的 MAP3K5 基因位于 6 号染色体上的 6q22.33 位点。转录的蛋白含有 1374 个氨基酸，有 11 个激酶亚域。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠凋亡信号调节激酶1(ASK1)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠凋亡信号调节激酶1(ASK1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的ASK1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312.5
156.25
78.12
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠ASK1 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.1-101.1
96.20
细胞裂解液(n=8)
92.0-105.0
102.50
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠ASK1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.9
91.10
88.2-96.7
93.80
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.0
94.80
87.5-108.4
98.30
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