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信号通路
英文名称: Mouse Visfatin (VF) ELISA Kit
别名: Visfatin
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.12-5000pg/mL
灵敏度: 33.52pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
内脂素(Visfatin)又称烟酰胺磷酸核苷转移酶(NAmPRT酶或NAMPT),以前被称为前B细胞集落增强因子1(PBEF1),是一种酶,由NAMPT基因编码。 该蛋白的细胞内形式(iNAMPT)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)挽救途径中的限速酶,该途径将烟酰胺转化为烟酰胺单核苷酸(NMN),负责哺乳动物中大部分NAD+的形成。当ATP存在时,iNAMPT还可以催化从焦磷酸磷酰(PRPP)合成NMN。虽然PBEF最初的细胞因子功能至今没有得到证实,但后来其他人报告或建议该蛋白具有类似细胞因子的功能。特别是Nampt/PBEF最近被重新确认为一种 "新的内脏脂肪衍生激素",名为visfatin。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠内脂素(Visfatin)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠内脂素(Visfatin)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的Visfatin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312.5
156.25
78.12
0
OD值
2.31
1.59
0.99
0.6
0.4
0.27
0.19
0.07
校正OD 值
2.22
1.5
0.9
0.51
0.18
0.18
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠Visfatin , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.4
96.60
血浆(n=8)
92.2-105.7
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.0
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠Visfatin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.5
91.90
88.1-96.2
93.90
89.9-110.1
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.8
94.30
87.7-108.7
98.50
105.1-115.1
108.10
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