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信号通路
英文名称: Mouse Erythropoietin (EPO) ELISA Kit
别名: EPO
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 17.35pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
促红细胞生成素(EPO)又称红细胞刺激因子,为糖蛋白,分子量约在2.5万~4.5万之间,是刺激红细胞生成的重要因素。动物在体缺氧的刺激下,肾脏产生的红细胞生成酶 (Erythrogenin) 作用于血浆内由肝生成的促红细胞生成素原,使它转化为促红细胞生成素。EPO属唾液糖蛋白激素,是一种内源性化合物,分子量为34000,由165个氨基酸组成。它主要来源于肾脏(少量来源于肝脏),由皮质管周围的间质细胞合成。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠促红细胞生成素(EPO)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠促红细胞生成素(EPO)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的EPO, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.38
1.8
1.28
0.89
0.6
0.45
0.33
0.09
校正OD 值
2.29
1.71
1.19
0.8
0.36
0.36
0.24
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠EPO , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.7
96.60
血浆(n=8)
92.3-105.8
102.40
细胞裂解液(n=8)
96.8-108.0
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠EPO , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.8-96.6
91.30
88.0-96.6
93.50
90.7-110.1
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.2
94.10
87.9-108.5
98.80
105.1-115.2
109.50
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