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信号通路
英文名称: Mouse 3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase (HBD-4) ELISA Kit
别名: DEFβ4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.37ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
DEFβ4(Defensin Beta 4,防御素β4)是一种属于防御素家族的小分子抗菌肽,在宿主免疫防御中发挥重要作用。DEFβ4由约64个氨基酸组成,包含3个二硫键,形成稳定的β-折叠结构。其N端具有信号肽,成熟肽通过切割信号肽后分泌到细胞外。与它相关的疾病包括口腔念珠菌病和尿道炎。其相关途径包括CF气道的细菌感染和防御素。该基因的一个重要的类似物是DEFB4B。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠防御素β4(DEFβ4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠防御素β4(DEFβ4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的DEFβ4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.32
1.93
1.31
0.85
0.51
0.39
0.28
0.1
校正OD 值
2.23
1.84
1.22
0.76
0.3
0.3
0.19
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠DEFβ4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.9
96.60
血浆(n=8)
92.3-106.0
103.80
细胞培养上清(n=8)
96.0-107.3
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠DEFβ4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.6-95.7
91.70
88.7-96.7
93.90
90.1-110.3
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.6
94.50
87.0-108.3
98.40
104.4-114.0
107.90
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