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信号通路
英文名称: Mouse Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4 (Smad4) ELISA Kit
别名: Smad4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.1ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Smad同源物4(Smad4),也被称为SMAD家族成员4或DPC4(Deleted in Pancreatic Cancer-4),是一种高度保守的蛋白质,存在于所有的元类动物。它属于转录因子蛋白的SMAD家族,作为TGF-β信号转导的媒介。TGFβ家族的细胞因子在后生动物的生命周期中调节关键过程,在胚胎发育、组织平衡、再生和免疫调节中具有重要作用。SMAD4属于co-SMAD组,是SMAD家族的第二类。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠Smad同源物4(Smad4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠Smad同源物4(Smad4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的Smad4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.54
1.73
1.25
0.83
0.53
0.37
0.3
0.1
校正OD 值
2.45
1.64
1.16
0.74
0.28
0.28
0.21
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠Smad4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.0-101.9
96.50
细胞裂解液(n=8)
92.4-105.2
102.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠Smad4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
85.7-95.5
91.90
90.2-110.6
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.4
94.40
105.7-115.6
108.60
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