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信号通路
英文名称: Mouse Selectin, Platelet (SELP) ELISA Kit
别名: P-Selectin;CD62P;GMP140
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000ng/mL
灵敏度: 6.37ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
P选择素(P-Selectin;CD62P;GMP140)是相对分子质量为140000的糖蛋白, 存在于血管内皮细胞的Weibe-l Palade 小体膜上及血小板α颗粒膜上,在受到组织胺、凝血酶、佛波酯和钙离子载体的刺激后,其迅速在质膜上表达, 缺氧/ 再氧化或氧自由基也可诱导表达。P-选择素凝集素样区是配体结合部位的关键序列,其配体是唾液酸化路易斯( S-Lewis x ) , 高亲和力的配体是P-选择素糖蛋白配体1( P-selectin glycoproteinlig and 1, PSGL-1) , 主要表达于中性粒细胞和单核细胞。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠P选择素(P-Selectin;CD62P;GMP140)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠P选择素(P-Selectin;CD62P;GMP140)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的P-Selectin;CD62P;GMP140, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.52
1.75
1.08
0.71
0.46
0.32
0.23
0.09
校正OD 值
2.43
1.66
0.99
0.62
0.23
0.23
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠P-Selectin;CD62P;GMP140 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.3
95.10
血浆(n=8)
92.0-105.6
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.9
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠P-Selectin;CD62P;GMP140 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.0
91.80
88.5-96.8
93.20
90.8-110.7
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.9
94.90
87.8-108.6
98.50
105.6-115.6
108.80
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