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信号通路
英文名称: Mouse N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) ELISA KIT
别名: NAGase
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.79ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)是一种溶酶体酶，存在于近端肾小管细胞中。NAG的分子量相对较高，约为13万-14万道尔顿，这不允许它通过肾小球基底膜过滤，它被肝脏迅速从循环中清除。这种酶在肾脏近端小管细胞中显示出高活性，并在超滤液通过近端小管时渗入小管液中。此外，这种酶的尿液水平随着近端肾小管细胞的成熟程度而变化。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的NAGase, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠NAGase , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.1-101.6
96.80
血浆(n=8)
93.3-105.4
103.10
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.0
105.70
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠NAGase , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-96.5
92.70
88.9-96.2
93.30
90.0-110.8
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.8
94.70
87.7-108.4
98.20
105.8-115.9
108.50
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