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信号通路
英文名称: Mouse Klotho (KL) ELISA Kit
别名: Klotho
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200pg/mL
灵敏度: 1.52pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
克洛素(Klotho)为一种跨膜蛋白,会调控生物体对于胰岛素的敏感性。它具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性,可以水解β-葡萄糖醛酸。β-克洛素会与FGF受体行程协同受体,可与FGF19、FGF20、FGF23等成纤维细胞生长因子(FGF)结合进行作用。克洛素的作用机转迄今未明,目前已知可以透过提升TRPV5和降低TRPC6的表达调控细胞的钙平衡。此外,克洛素也会增加内向整流离子通道ROMK的表达。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠Klotho蛋白(Klotho)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠Klotho蛋白(Klotho)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的Klotho, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.14
1.21
0.81
0.53
0.39
0.3
0.25
0.09
校正OD 值
2.05
1.12
0.72
0.44
0.21
0.21
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的小鼠Klotho , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.7
96.80
血浆(n=8)
92.3-105.9
103.60
组织匀浆(n=8)
96.4-108.1
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度小鼠Klotho , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.0
91.10
88.6-96.0
93.20
90.0-110.3
96.30
1:04
范围
平均回收率
88.3-103.0
94.30
87.2-108.1
98.60
105.8-114.3
107.60
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