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信号通路
英文名称: Mouse Differentiation 86 (CD86) ELISA Kit
别名: CD86
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.067ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
CD86 分子(CD86)是一种在树突状细胞、朗格汉斯细胞、巨噬细胞、B 细胞(包括记忆 B 细胞)以及其他抗原呈递细胞上构成性表达的蛋白质。根据所结合的配体,它可以发出自我调节和细胞-细胞结合的信号,也可以发出调节减弱和细胞-细胞不结合的信号。CD86 基因编码一个 I 型膜蛋白,是免疫球蛋白超家族的成员,替代剪接导致两个转录变体编码不同的异构体。它由类似 Ig 的细胞外结构域(一个可变的和一个不变的)、一个跨膜区和一个比CD80 长的短胞质结构域组成。与 CD80 相比,它的表达更为丰富,而且在其激活时,它的增加速度比 CD80 快。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠CD86分子(CD86)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠CD86分子(CD86)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的CD86, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.48
1.65
1.07
0.71
0.45
0.28
0.19
0.09
校正OD 值
2.39
1.56
0.98
0.62
0.19
0.19
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠CD86 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.8-101.6
96.60
细胞裂解液(n=8)
92.6-105.3
102.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠CD86 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
85.2-95.4
91.10
88.1-96.8
93.90
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.3
94.50
87.6-108.6
98.20
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