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信号通路
英文名称: Mouse Cluster Of Differentiation 14 (CD14) ELISA Kit
别名: CD14
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 125-8000pg/mL
灵敏度: 66.34pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
CD14分子(CD14)是一种蛋白质,主要由巨噬细胞制造,是先天免疫系统的一部分。CD14以两种形式存在,一种是通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)的尾巴固定在膜上(mCD14),另一种是可溶性的形式(sCD14)。可溶性CD14要么在mCD14脱落后出现(48 kDa),要么直接从细胞内囊泡分泌(56 kDa)。它是第一个被描述的模式识别受体。CD14只有在脂多糖结合蛋白(LBP)存在的情况下才能结合LPS。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠CD14分子(CD14)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠CD14分子(CD14)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的CD14, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
8000
4000
2000
1000
500
250
125
0
OD值
2.17
1.74
1.17
0.78
0.47
0.32
0.23
0.08
校正OD 值
2.08
1.65
1.08
0.69
0.23
0.23
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠CD14 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-103.6
97.20
血浆(n=8)
92.6-105.9
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.3
104.20
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠CD14 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-96.4
92.10
88.6-96.5
93.50
90.9-110.7
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.8
94.20
87.8-108.3
98.50
105.8-115.0
108.70
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