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信号通路
英文名称: Mouse Protein Kinase B Alpha (PKBa) ELISA Kit
别名: AKT1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.074ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶由 AKT1 基因编码。该酶属于 AKT 亚家族的丝氨酸/苏氨酸激酶，含有 SH2（Src 同源性 2-like）蛋白结构域。它通常被称为 PKB，或同时被称为 "Akt/PKB"。丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶 AKT1 在血清干燥的原生和永生成纤维细胞中没有催化作用。AKT1 和相关的 AKT2 被血小板衍生的生长因子激活。缺乏 Akt1 的小鼠显示身体质量减少 25%，表明 Akt1 对于传递促进生长的信号至关重要，很可能是通过 IGF1 受体。缺少Akt1 的小鼠对癌症也有抵抗力。它们在由大 T 抗原或 Neu 肿瘤基因启动的肿瘤生长中经历了相当大的延迟。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠AKT1蛋白(AKT1)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠AKT1蛋白(AKT1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的AKT1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的小鼠AKT1 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.9-101.6
96.50
细胞裂解液(n=8)
92.3-105.8
102.40
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度小鼠AKT1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.9
91.90
88.4-96.2
93.90
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.3
94.60
87.0-108.4
98.90
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