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信号通路
英文名称: Rat Choline transporter (ChT) ELISA Kit
别名: ChT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.12-5000pg/mL
灵敏度: 39.5pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
高亲和力胆碱转运蛋白(ChT),也被称为溶质载体家族5成员7(SLC5A7),是由SLC5A7基因编码的蛋白质。它是细胞膜转运和携带胆碱成乙酰胆碱合成的神经元。Hemicholinium-3是ChT的抑制剂,可用于消耗乙酰胆碱的储存,而coluracetam是ChT的增强剂,可通过增强乙酰胆碱的合成来增加胆碱能神经传递。它是一种Na(+)-和Cl(-)-依赖性高亲和力转运蛋白,介导胆碱能神经元中乙酰胆碱合成的胆碱摄取。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠高亲和力胆碱转运蛋白(ChT)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠高亲和力胆碱转运蛋白(ChT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的ChT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312.5
156.25
78.12
0
OD值
2.04
1.4
0.89
0.64
0.42
0.27
0.21
0.06
校正OD 值
1.95
1.31
0.8
0.55
0.18
0.18
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠ChT , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
81.0-101.6
96.80
细胞裂解液(n=8)
92.8-105.0
103.30
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠ChT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.3
91.60
85.6-96.5
93.20
1:04
范围
平均回收率
89.8-102.2
92.40
87.8-108.3
98.10
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