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信号通路
英文名称: Rat Osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit
别名: OPG
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 12.11pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
骨保护素(OPG),也被称为破骨细胞生成抑制因子(OCIF)或肿瘤坏死因子受体超家族成员11B(TNFRSF11B),是由TNFRSF11B基因编码的肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族的一个细胞因子受体。OPG是一种可溶性的糖蛋白,可以是60kDa的单体,也可以是120kDa的二聚体,由二硫键连接。它由380个氨基酸组成,形成7个功能域。1-4域是富含半胱氨酸的N端域,在结合过程中与RANKL相互作用。5-6域是死亡域,有助于OPG的二聚化。7域是C端肝素结合域,以一个半胱氨酸(Cys-400)结束,也在OPG的二聚化中发挥重要作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠骨保护素(OPG)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠骨保护素(OPG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的OPG, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.37
1.58
1.01
0.65
0.43
0.31
0.22
0.09
校正OD 值
2.28
1.49
0.92
0.56
0.22
0.22
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠OPG , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.9
96.30
血浆(n=8)
92.9-105.9
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.2
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠OPG , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.7-95.0
91.90
88.3-96.8
93.20
90.2-110.8
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.5
94.50
87.5-108.1
98.60
105.1-115.1
108.80
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