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信号通路
英文名称: Rat Serine/threonine-protein kinase mTOR (mTOR) ELISA Kit
别名: mTOR
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.1ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
雷帕霉素靶蛋白(mTOR),以前被称为哺乳动物雷帕霉素靶点,有时被称为FK506结合蛋白12-雷帕霉素相关蛋白1(FRAP1),由MTOR基因编码的激酶。mTOR与其他蛋白相连,并作为两个不同的蛋白复合物--mTOR复合物1和mTOR复合物2的核心成分,调节不同的细胞过程。特别是,作为两个复合物的核心成分,mTOR作为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,调节细胞生长、细胞增殖、细胞运动、细胞生存、蛋白合成、自噬和转录。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠雷帕霉素靶蛋白(mTOR)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠雷帕霉素靶蛋白(mTOR)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的mTOR, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.6
1.74
1.07
0.66
0.43
0.31
0.23
0.09
校正OD 值
2.51
1.65
0.98
0.57
0.22
0.22
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠mTOR , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.0-105.8
102.80
细胞裂解液(n=8)
96.2-108.1
105.40
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠mTOR , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.8-96.6
92.10
90.7-110.0
98.60
1:04
范围
平均回收率
87.6-108.6
99.10
105.4-115.0
108.30
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